4-Нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS: 200422-18-0

Үр нөлөө: ONPG нь β-галактозидаза ферментийн оршихуй, идэвхийг илрүүлэхэд тусгайлан ашигладаг субстрат юм.β-галактозидазын фермент идэвхтэй байх үед ONPG-ийг хоёр бүтээгдэхүүн болгон задалдаг: о-нитрофенол ба галактозын дериватив.О-нитрофенол ялгарах нь шар өнгө өөрчлөгдөхөд хүргэдэг бөгөөд үүнийг спектрофотометр ашиглан хэмжиж болно.

Хэрэглээ: ONPG нь молекул биологи, биохимийн судалгаанд хэд хэдэн хэрэглээтэй:

β-галактозидазын идэвхийг тодорхойлох: ONPG нь β-галактозидазын ферментийн идэвхийг хэмжих, хэмжихэд түгээмэл хэрэглэгддэг.Ферментийн идэвхжилтэй шууд хамааралтай о-нитрофенол үүсэх хурдыг спектрофотометрээр хэмжиж болно.

Генийн илэрхийлэл ба зохицуулалт: ONPG нь генийн илэрхийлэл, зохицуулалтын судалгаатай холбоотой туршилтуудад ихэвчлэн ашиглагддаг.Энэ нь тусгай дэмжигчдийн хяналтан дор генийн илэрхийлэлийг судлахад түгээмэл хэрэглэгддэг lacZ хайлуулах систем гэх мэт хайлуулах уургийн шинжилгээнд ихэвчлэн ашиглагддаг.ONPG ашиглан хэмжсэн бета-галактозидазын идэвхжил нь генийн илэрхийлэлийн түвшний талаарх ойлголтыг өгдөг.

β-галактозидазын идэвхжлийг илрүүлэх скрининг: ONPG-ийг рекомбинант ДНХ-ийн технологид β-галактозидазыг кодлодог LacZ генийн оршихуй, үйл ажиллагааг тодорхойлохын тулд колориметрийн скринингийн арга болгон ашиглаж болно.Энэхүү скринингийн арга нь сонирхсон генийг агуулсан клоныг тодорхойлоход тусалдаг.

Ферментийн кинетикийн судалгаа: ONPG нь β-галактозидазын ферментийн кинетикийг судлахад бас тустай.Янз бүрийн субстратын концентрацид фермент-субстратын урвалын хурдыг хэмжих замаар Майклис-Ментен тогтмол (Км) ба хамгийн их урвалын хурд (Vmax) зэрэг кинетик параметрүүдийг тодорхойлох боломжтой.